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MTT Cell Proliferation Assay Kit (MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 )

货号 S4025 售价(元) 616
规格 1000T CAS号
  • 产品简介
  • 相关产品

货号

名称

规格

价格(元)

S4015

MTT Cell Proliferation Assay Kit MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 )

500T

352

S4025

MTT Cell Proliferation Assay Kit MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 )

1000T

616

产品简介:

MTT 比色法是一种检测细胞存活和生长的方法。 MTT 细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测。MTT 检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性 MTT 还原为水不溶性的蓝紫色 Formazan 并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。在特定溶剂存在的情况下,可以被完全溶解。然后通过酶标仪可以测定 570nm 波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快,则吸光度越高;细胞毒性越大,则吸光度越低。

warbio MTT 细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒采用了特有的 Formazan solvent,使检测本底低,灵敏度高,线性范围宽.


试剂盒组分 

组分 A: MTT Solution(5mg/ml)  5 mL      -20℃,避光

组分 B: Formazan Solvent       60 mL     RT


保存条件:

    -20℃,避光 条件下保存,保质期 12 个月。

操作步骤(仅供参考)

1、 细胞用含血清的培养液培养至对数生长期,常规胰蛋白酶消化液消化细胞(悬浮细胞无需消化)

2、 低速离心,收集细胞沉淀。

3、 用培养液重悬细胞沉淀,制备成单细胞悬液,并计数。

4、 细胞接种于 96 孔培养板,一般接种密度为 300010000 个细胞/孔。通常细胞增殖实验每孔加 3000 个细胞,细胞毒性实验每孔加入 6000 个细胞。具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定。

5、 37℃ 5%CO2继续培养或按照实验具体需要进行培养,一般培养 624h

6、 按照实验具体要求,给予 020μl 干预药物处理,37℃ 5%CO2继续培养至合适时间。

7、 弃培养液,每孔加入 10μl MTT solution 100μl 新鲜培养液,在细胞培养箱内继续孵育 4h

8、 弃培养液,每孔加入 110μl Formazan solvent,置摇床上低速振荡 10 min,使结晶物充分溶解。如果紫色结晶较小或较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大或较多,溶解的时间会长一些。

9、 在酶联免疫检测仪 570nm 测定各孔吸光度。

      注意事项

MTT solution 尽量减少反复冻融的次数,当颜色变为灰绿色时,请勿使用。

由于使用 96 孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,应注意蒸发问题。

 MTT solution 在低温情况下会凝固,置于室温或 2025℃水浴至全部融解后使用。

Formazan solvent 可以-20℃储存,当产生沉淀或凝固时可以 37℃水浴孵育以促进溶解,并且必须在全部溶解并混匀后使用。

观察 formazan 是否完全溶解,亦可以借助光学显微镜观察。

培养细胞时尽量细菌避免污染。

应注意设立 OD 调零孔和对照。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。。

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